VII Съезд биофизиков России
Краснодар, Россия
17-23 апреля 2023 г.
17-23 апреля 2023 г.
|
|
VII Съезд биофизиков России
Краснодар, Россия
17-23 апреля 2023 г. |
|
Программа СъездаСекции и тезисы:
Медицинская биофизика. НейробиофизикаОценка созревания профессиональных антигенпрезентирующих клеток после сокультивации с фотоиндуцированными тетра(арил)тетрацианпорфиразином клетками мышиной глиомыТ.С. Редькин3*, М.О. Савюк3,1, Е.Е. Слепцова3, В.Д. Турубанова3, М.В. Ведунова3, Д.В. Крысько3,1,2 1.Лаборатория исследования и терапии гибели клеток (CDIT), факультет анатомии и реабилитации человека, Гентский университет, Гент, Бельгия; 2.Институт исследований рака Гента, Гент, Бельгия; 3.Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского; * big.t.nsdav(at)outlook.com В предыдущих исследованиях был продемонстрирован иммуногенный потенциал умирающих/мертвых клеток глиомы GL261, которые были подвергнуты фотодинамической терапии (ФДТ) на основе pz II. Фотоактивированные клетки активно испускают молекулярные паттерны, ассоциированные с повреждением (DAMPs), такие как АТФ, HMGB1, и экспонируют кальретикулин (CRT) на внешней клеточной мембране, что является сигналом к активации профессиональных антигенпрезентирующих клеток - дендритных клеток.
Целью стала оценка созревания дендритных клеток in vitro при сокультивировании с ФДТ-активированными клетками глиомы. Для подтверждения созревания дендритных клеток была проведена оценка уровня экспозиции клеточного рецептора CD86 на поверхности дендритных клеток. Клетки глиомы GL261 подвергались ФДТ на базе pz II. После мертвые/умирающие клетки сокультивировались вместе с наивными дендритными клетками, изолированными из костного мозга мыши линии С75/Bl7, в течение 24 часов. Созревание дендритных клеток оценивалось при помощи красителя anti-CD86-eFluor 450 (eBioscience), который связывается с CD86 на поверхности дендритных клеток (CD11c+), методом проточной цитометрии. Было показано, что клеточный рецептор CD86 активно экспонируется на поверхности дендритных клеток, которые распознали мертвые/умирающие клетки глиомы GL261, что говорит об их созревании. Однако, для полноценного вывода об активной антигенпрезентации необходимо рассмотреть фагоцитарную активность дендритных клеток и проанализировать активность высвобождения основных сигнальных молекул IL-12p70 и IL-6 активированными дендритными клетками. Исследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда № 22-25-00716, https://rscf.ru/project/22-25-00716/ professional antigen-presenting cells maturation after co-cultivating with murine glioma cells photoinduced by tetra(aryl)tetracyanporphyrasineT.S. Redkin3*, M.O. Saviuk3,1, E.E. Sleptsova3, V.D. Turubanova3, M.V. Vedunova3, D.V. Krysko3,1,2 1.Cell Death Investigation and Therapy (CDIT) Laboratory, Department of Human Structure and Repair, Ghent University, Ghent, Belgium; 2.Cancer Research Institute Ghent, Ghent, Belgium.; 3.National Research Lobachevsky State University of Nizhny Novgorod.; * big.t.nsdav(at)outlook.com Our previous studies demonstrated the immunogenic potential of dead/dying GL261 glioma cells induced by pz II-based photodynamic therapy (PDT). Photoactivated cells emit damage-associated molecular patterns (DAMPs) such as ATP and HMGB1, and exhibit calreticulin (CRT) on the cell membrane. DAMPs recognition activates dendritic cells maturation.
The aim of this study was to evaluate the maturation of dendritic cells co-cultured with PDT-activated glioma cells in vitro. To confirm the maturation of dendritic cells, we assessed the level of exposure of CD86 cell receptors on the surface of dendritic cells. First, GL261 glioma cells were activated by pz II-PDT. Subsequently, dead glioma cells were co-cultured with naive dendritic cells isolated from the C75/Bl7 mouse bone marrow for 24 h. Dendritic cell maturation was assessed by flow cytometry using anti-CD86-eFluor 450 dye (eBioscience), which binds to CD86 on the surface of dendritic cells (CD11c+). CD86 receptors were actively exposed on the surface of dendritic cells indicating their maturation. However, to verify the complete antigen presentation process, it is necessary to consider the phagocytic activity of dendritic cells, and analyze the levels of the main signaling molecules IL-12p70 and IL-6 produced by activated dendritic cells. The study was supported by the Russian Science Foundation grant No. 22-25-00716, https://rscf.ru/project/22-25-00716/ Докладчик: Редькин Т.С. 156 2023-02-14
|