Мексиприм – оригинальный отечественный лекарственный препарат производства АО «НИЖФАРМ» (Нижний Новгород, Россия). Основным действующим веществом является этилметилгидроксипиридинасукцинат (ЭМГПС), относящийся к классу 3-оксипиридинов (3-ОП), а вспомогательным элементом выступает – натрий бисульфит[1]. Препарат обладает широким спектром биологического действия.Он используется для ликвидации антигипоксического, противосудорожного и стресс-протективного воздействия. ЭМГПС ускоряет обменные процессы и кровоснабжение головного мозга, уменьшает агрегацию клеток свертывания крови, стабилизирует мембраны эритроцитов.Однако, ранее нами была установлено, что воздействие препарата «Мексиприм» на суспензии эритроцитов человека способствовало изменению их цитоархитектоники и снижению числа двояковогнутых дискоцитов[2]. Одним из высокочувствительных методов изучения структурного состояния эритроцитов, позволяющим понять биофизические основы взаимодействия клеток крови с модификаторами, является спектрофотометрия в УФ- и видимой области. В связи с вышеизложенным, целью данной работы явилось исследование влияния лекарственного препарата «Мексиприм» на спектральные свойства суспензии эритроцитов крови доноров в течение разного временного периода.

Эритроциты получали из крови доноров в день взятия пробы по методике [3]. Лекарственный препарат «Мексиприм» (АО «НИЖФАРМ» Нижний Новгород, Россия) с концентрацией 3,18∙10-2 моль/л добавляли к 9 мл суспензии эритроцитов с концентрацией 5 • 106кл/мл и инкубировали в суховоздушном термостате ТС-1/80 СПУ (Россия) при +37 °C в течение 1 и 24 ч. Электронные спектры поглощения (ЭСП) эритроцитов до и после воздействия лекарственного препарата «Мексиприм» регистрировали на спектрофотометре UV-2401 PC (Shimadzu, Япония) в диапазоне длин волн от 230 до 700 нм через 1 нм при ширине спектральной щели 1 нм.

ЭСП нативных эритроцитов доноров характеризовались наличием двух пиков в УФ-области (273-275 и 341-347нм) и трех полос поглощения в видимой части спектра (418, 543 и 578нм). После инкубации интактных эритроцитов при 370С в течение 1 ч не было обнаружено сдвигов максимумов поглощения и статистически достоверных отличий величин оптической плотности образцов по сравнению с контролем.Модификация эритроцитов лекарственным препаратом «Мексиприм» в течение 24 ч вызывала заметные изменения как УФ-, так и в видимой области ЭСП. Так,значения оптической плотности эритроцитов во всех максимумах ЭСП заметно понижаются, что свидетельствует об уменьшении светорассеивания анализируемых образцов в присутствии модификатора. Кроме того, максимум при 341-347 нм из-за изменений в области контактов гемового и глобинового компонентов белка сместился до 329-334нм.Одновременно произошло снижение значения оптической плотности в полосе Соре с 0,816±0,046 до 0,675±0,034 и её сдвиг до 409 нм, обусловленные накоплением в образцах окисленных форм гембелка – метгемоглобина.



Библиографические ссылки

1. Справочник Видаль: Лекарственные препараты в России / Москва.: Изд-во АстраФармСервис, 2011. ― 1728 с.

2. Ковалева С.А., Небольсина А.А., Путинцева О.В., Артюхов В.Г. Исследование цитоархитектоники эритроцитов человека, модифицированных воздействием лекарственного препарата «Мексиприм» и УФ-света / Материалы Всероссийской молодежной конференции «Экспериментальная и теоретическая биофизика, 17». – Пущино: ФГБУН Институт теоретической и экспериментальной физики РАН, 2017. – С. 31-32.

3. Артюхов В.Г. Практикум по биофизике / В.Г. Артюхов [и др.] — Воронеж: Изд-во ВГУ, 2016. — 294 с.

Mexiprim is an original domestic drug produced by NIZHPHARM (Nizhny Novgorod, Russia). The main active ingredient is ethylmethylhydroxypyridine succinate (EMHPS) belonging to 3-oxypyridine class (3-OP), and the auxiliary element is sodium bisulfite[1].The drug has a wide range of biological action.It is used to eliminate antihypoxic, anticonvulsant and stress-protective effects. EMGPS accelerates metabolic processes and blood supply to the brain, decreases blood coagulation cell aggregation and stabilizes erythrocyte membranes.However, we previously found that the effect of Mexiprim drug on human erythrocyte suspensions contributed to changes in their cytoarchitectonics and reduced the number of biconvex discocytes[2]. One of the highly sensitive methods to study the structural state of erythrocytes to understand the biophysical basis of interaction of blood cells with modifiers is spectrophotometry in the UV- and visible regions. In view of the above, the aim of this work was to study the effect of the drug Mexiprim on the spectral properties of erythrocyte suspension of donor blood over different time periods.

Erythrocytes were obtained from donor blood on the day of sampling according to the method [3]. The drug Mexiprim (JSC NIZHPHARM, Nizhny Novgorod, Russia) with 3.18∙10-2mol/L concentration was added to 9 ml of erythrocyte suspension with 5 - 106 µl/ml concentration and incubated in TS-1/80 SPU dry-air thermostat (Russia) at +37 °C for 1 and 24 h. Electronic absorption spectra (EAP) of erythrocytes before and after exposure to Mexiprim were recorded by UV-2401 PC (Shimadzu, Japan) in wavelength range from 230 to 700 nm at 1 nm with spectral slit width of 1 nm.

The EAP of native donor erythrocytes were characterized by two peaks in the UV-region (273-275 and 341-347nm) and three absorption bands in the visible part of the spectrum (418, 543 and 578nm). After incubation of erythrocytes at 370°C for 1 h we didn't observe shifts of absorption maxima and statistically reliable difference of samples optical density in comparison with control. 24 h the modification of erythrocytes with Mexiprim induced distinct changes both in UV- and visible regions of ESP. Thus, values of erythrocyte optical density in all ESP maxima markedly decrease, indicating a decrease in light scattering of analyzed samples in the presence of the modifier. Moreover, the maximum at 341-347 nm was shifted to 329-334 nm due to changes in the contact area of heme and globin protein components. Simultaneously, there was a decrease in the optical density in the Sore band from 0.816±0.046 to 0.675±0.034 and its shift to 409 nm, caused by accumulation of oxidized forms of heme protein - methemoglobin in samples.



Bibliographic references

1. Handbook Vidal: Medicines in Russia / Moscow.: Publishing house AstraPharmService, 2011. - 1728 с.

2. Kovaleva SA, Nebolsina AA, Putintseva OV, Arthukhov VG Study of human erythrocytes cytoarchitectonics, modified by exposure to the drug "Mexiprim" and UV light / Proceedings of the All-Russian Youth Conference "Experimental and Theoretical Biophysics, 17". - Pushchino: FGBUN Institute of Theoretical and Experimental Physics RAS, 2017. - С. 31-32.

3. Artyukhov V.G. Practicum on biophysics / V.G. artyukhov [et al.] - Voronezh: Publishing house of VGU, 2016. - 294 с.